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突變體富集PCR法(mutant-enriched PCR)

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-01

突變體富集PCR法(mutant-enriched PCR)的基本原理是利用ras基因家族某個(gè)密碼子部位存在已知的限制性內(nèi)切酶位點(diǎn),如K-ras基因第12密碼子的BstNI位點(diǎn),第13密古巴子有BgⅠⅡ位點(diǎn)。用鏈續(xù)二次的巢式PCR來(lái)擴(kuò)增包括K-ras第12、13密碼子的DNA片段,在兩次擴(kuò)增反應(yīng)之間用相應(yīng)的內(nèi)切酶消化擴(kuò)增的DNA片段,野生型因被酶切而不能進(jìn)入第二次PCR擴(kuò)增,而突變型則能完整進(jìn)入第二次PCR擴(kuò)增并得到產(chǎn)物的富集。

 

 

 

 
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