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ELISA實(shí)驗(yàn)的操作方法

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2025-03-07  來源:網(wǎng)絡(luò)
核心提示: 測定方法試劑盒,通常采用固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)進(jìn)行測定。具體步驟如下:‌標(biāo)準(zhǔn)品稀釋與加樣‌:在
 測定方法

試劑盒,通常采用固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)進(jìn)行測定。具體步驟如下:

‌標(biāo)準(zhǔn)品稀釋與加樣‌:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔,加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品。

‌加樣‌:設(shè)空白孔和待測樣品孔,加入樣品稀釋液和待測樣品。

‌溫育‌:用封板膜封板后置于適宜溫度(如37℃)溫育一定時間(如30分鐘)。

‌洗滌‌:揭掉封板膜,棄去液體,加入洗滌液洗滌多次。

‌加酶‌:每孔加入酶標(biāo)試劑(空白孔除外)。

‌再次溫育和洗滌‌:重復(fù)溫育和洗滌步驟。

‌顯色‌:加入顯色劑A和B,避光顯色一定時間(如15分鐘)。

‌終止‌:加入終止液終止反應(yīng)。

‌測定‌:在酶標(biāo)儀上,通常選擇450nm波長測定各孔的吸光度(OD值)。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度和對應(yīng)的OD值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,然后根據(jù)待測樣品的OD值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查找對應(yīng)的濃度‌。
編輯:songjiajie2010

 
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